原发布者:大姆哥359
植物超氧阴离子自由基含量的测定一、实验目的学习测定植物组织中超氧阴离子自由基含量的方法二、实验原理进入生物体内的一些分子氧（O2），可经单电e79fa5e98193e78988e69d8331引罗只担西商封声破单333433623761复晶子还原转变为超氧阴离子自由眼开鱼抓宁刻整死影基，特别是在逆境条件下这种单电子还原的几率更大。超氧阴离子即可直接作用于蛋白质和核酸等生物分子，也可衍生为羟自由基、单线态氧、过氧化氢及脂质过氧化物自由基等活性氧，引起对细胞结构和功能的破坏。因此测定逆境条件下植物组织中超氧阴离子自由基产生及清除速率，可间接了解组织细胞受损状况和抗性强弱。超氧阴离子自由基（·）能与羟胺反应，生成N，N能与对氨样部防转权孩些例基苯磺酸和а-萘胺反应生成粉林变飞型绍况红色的偶氮染料，该染料在530nm波长处具有显著光吸收。因此利用羟胺氧化的方法可以测定植物组织中超氧阴离子自由基（·）的含量。三、器材与试剂1．实验仪器与用具研钵、高速冷冻离心机、微量移液枪、离心管、试管、水浴锅、胞油普告容量瓶（10mL）、分光光度计妈封2．实验试剂65mmol/L磷酸钾缓冲液（pH7.活没升他须艺8）；提取缓冲液；10mmol/L盐酸羟胺溶液；58mmol/L对氨基苯磺酸溶液；7mmol/Lа-萘胺溶液；50μmol/LKNO2标准溶液3．实验材料小白菜、小麦四、实验步骤1.制作标准曲线取7支试管，编号，按表1分别加入各种试剂，摇匀。置25℃保温箱20min。分别加入1mL58mmol/L对氨基苯磺酸溶液和1mL7mmol/Lа-萘胺溶液，混匀。25℃保温20min，以0号管为对照进行调零，立即在波长530nm处测定吸光度。以家激了屋考液充吸光度值为纵坐标，N物质的量（5μmol）
