【高分急求】免疫印迹和免疫共沉淀结果图分析
这是一张免疫印迹与免疫共沉淀的结果图 。。第一次拿到这种图真心不懂得分析。。求大神帮忙。。考核中请速度。。向左转|向右转免疫印迹IB 免疫共沉淀IP具体疑问。。问题1、为什么第一个电泳图左边标了IP:Flag和IB：VSV？到底是IP还是IB的结果？问题2:：IB:Flag里这么多条带都是什么含义啊。。问题3：为什么要做细胞提取物(XT)的IB：VSV问题4：IP和IB分别用Flag和VSV的用意是什么。。问题5：IP:Flag、IB：VSV和IB：Flag（也就是说除了XT以外的）这三个部分（红框 ）是对什么对象的分析。。为什么要分别作这个部分和XT的？ 还有。。图C为什么IP和IB用的VSV或者Flag与图B就不同了。。XT有两条带说明什么。。 图片来源的文章是DAIZBP1 recruits RIP1 and RIP3 through RIP homotypic interaction motifs to activate NF-B
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回答者：网友
这位同学，你既然知道了原图的出处，就应该仔细分析一下文献。在这篇文章里：HEK293T cells were transfected with the indicated VSV or Flag constructs. Immunoprecipitates and cell extracts were analysed by immunoblot. 问题1： IP，代表的是用该蛋白来沉淀，然后用的抗体来识别。问题2：你要看原图，有不同载体的结构，那些条带是相对于不同载体所表达出的蛋白。问题3：这个是作为加样对照，标示加样量是一致的问题4：抗体比较好，容易获得，不用针对每一种不同的蛋白采用不同的抗体问题5：用FLAG做IP，而出现结果，说明这两个融合蛋白是相互结合的，光有FLAG，没有不结合。还有的回答：因为这个图研究的是不同的融合蛋白（看原文），两个条带是因为有磷酸化的发生
