先将海马神经元用含血清的落棉始翻养培养液接种，待神经元黏附于底物后再换成不含血清的培养液。接种用的培养液由含600mg/ml 葡萄糖的MEM加10％马血清组成，培养液中还需补充下列成分：终浓度为100ug/ml 的转铁蛋白、5ug/ml胰岛素、20 nmol孕酮、100umol/L腐胺、30nmol/L二氧化硒。此来自外，有时还需添加1mmol/L丙酮酸钠和0.1％卵白蛋白。这些补充成分的贮存液应置于 -20℃保存，胰岛素贮存液应溶解于0.01NHCL中。
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