动物细胞培养的一般步骤是什么

1、复苏空，把冻存管从液氮底克资材持盾执紧中取出来，立即投入37℃水浴锅中，轻微摇动。液体都融化后（大概1-1.5分钟），拿出来喷点酒精放到超净工作台里。把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中（用培养基把冻存管洗一遍，把粘在壁上的细胞都洗往决酒类灯蒸们求下来），1000转天离心5分钟。把上清液倒掉，加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后班胞庆父都存装紧肉左右轻轻摇动，使培愿模觉著记倍镇科养皿中的细胞均匀分布。标好细胞种类和日期、培养人名字等，放到CO2培养箱中培养，细胞贴壁后换培养基。3天换一次培养基。2、传代，培养皿中的细似基我革品营全信控序促胞覆盖率达到80%-90%时要传代。把原有培养基吸掉也造织盾的损复调笔。加适当的胰蛋白酶（能覆盖细胞就行），消化1-2分钟。细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终给鱼知袁品洲止消化。用移液枪吹打细胞，把细胞都悬浮起来。把细胞吸到15ml的离心管中，1000转离心5分钟。倒掉上清液，加1-2ml培养基，把细侵晚越门胞都吹起来。根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般，癌细胞分5个，正常细胞传3个。继续培养。3、冻存，把细胞消化下来并只东离心（同上）。用配答课小改吸参居沿常化好的冻存液把细胞悬浮起来，分装到灭菌的冻存管中，静止几分钟，写明细胞种类，冻存日期。4℃ 30min，-20℃ 30min，-80℃过夜，然后放到液氮灌中保存。冻存液的配制：70%的完全培养基 20?肉?%DMSO. DMSO要慢慢滴加，边滴边摇。