蛋白质定量测量方法除双缩脲法外,还有哪些测定方法?
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染料法
在酸性溶液中染料考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合,此时考马斯亮蓝G-250颜色从红色变为蓝色,吸收高峰从460nm移至595nm。利用这个原理可以测定蛋白质含量。
酚试剂法测定血清蛋白质含量
蛋白质分子中所含肽键在碱性条件下与铜络合生成复合物产生紫红色化合物(双缩脲反应),同时使肽链展开,蛋白质中半胱氨酸、络氨酸、色氨酸和组氨酸均能使钨酸、钼酸同时失去1个,2个或者3个氧原子,还原成多种还原型的混合酸,并且有特殊的蓝颜色。其蓝色深浅与蛋白质含量在一定范围内成正比,由此可测出样品中蛋白质的含量。同时蛋白质肽键发生烯醇化反应能使钼离子在pH10时螯合在肽结构中,形成复合物,从而使电子转移到混合酸的显色剂上,大大增加了酚试剂对蛋白质的敏感性。