柱层析实验报告

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柱层析分离色素一、【实验目的】1.了解柱层析的分类,掌握各种柱层析的原理。2.形功再兰星熟练掌握吸附层析的原理和操作技术。二、【实验原理】叶绿体色广跑素是植物吸收太阳光能进行光合作用的重要物质,主要有叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素组成。从植物叶片中提取和分离叶绿体色素是对其认识和了解的前提。利用叶绿体色素能溶于有机溶剂的特性,可用95%乙醇或无水乙醇提取。分离色素的方法有多种,如纸层析、柱层析等。柱层析法是色谱法中的一种,它是根据混合物中各组分对门支元丰个凯这乱白固定相的吸附能力,以及对洗脱剂(即移动相)的溶解度不同将各组分分离。常映构孔殖项九余语程用的柱色谱有吸附色柱谱和分配柱色谱两类。吸附柱色谱通常是在玻璃管中填入表面积很然到内急积械大,经过活化的多孔性普要科指物质或粉状固体作为吸附剂(如氧化铝或硅胶),当混合物的溶液流经吸附柱时,就被吸附在柱的上端,然后从柱顶加入溶剂(洗脱剂)洗脱。由于不同化合物在吸附柱上的吸附能力不同,在同一溶剂中的溶解度也不同,因此各组分随溶剂以不同速度下移,形成色带。继续用溶剂洗脱,吸附能力最弱的组分就随溶剂首先流出,整个层货剂振尔沉析过程进行反复的吸附-解析-再吸附-再解吸。步肥否被用柱层析法可以分别收集各组分,并逐个鉴定。本实验是把三氧化二铝填入玻璃管中(压成柱状)作为吸附剂,将叶绿体色素的石油醚提取液倾于吸附柱上,色素即被吸附。由于色素的种类不同,被吸附的强弱不同,就在吸附乱划上柱上排列成为不同的色层,再利用吸附剂在不同溶剂中有不同的吸附力,

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