工业化生产乳酸菌的液体培养基的配方

1材料与方法1.1 材料1.1.1菌种：鸡源乳酸菌（本研究所分离、鉴定保存）1.1.2原材料及试剂：酵母粉、葡萄糖、玉米糖浆、微量盐及其他特殊成分；MRS液体培养基，琼脂粉，5NNaOH溶液1.1.3仪器及设备：三角烧瓶、二重皿、全温振荡培养箱、高压消毒锅、微量移液器、全自动发酵罐等。1.2方法1.2.1种子液准备：取出菌种保藏管用MRS固体培养基划平板进行复苏，37度厌氧培养48h。在平皿上挑取单个菌落接种50mlMRS液体培养基中，在摇床中37度厌氧培养48h。染色、镜检种子液，观察菌体生长情况及有无杂菌生长。1.2.2正交试验培养基配制；根据细菌组成的碳氮比来确定原材料的浓度配比，选择5种原材料，确定4个浓度，采用正交表L16（45）共安排16次试验，每个试验配培养基各100ml，调整pH值置150ml三角瓶中消毒，备用。1.2.3接种与培养：正交试验种子采用2％接种量，接种后置三角瓶与37度震荡培养。每8h调一次pH值，培养36h用梯度稀释和平板涂布法检测活菌数。1.2.4发酵中试：根据正交试验结果，确定配方，采用150升种子罐和1.5吨发酵罐进行中试，培养温度37度，转速120-150转／min，培养时间36-48h，用梯度稀释和平板涂法检测活菌数。2 结果2.1通过正交试验，培养36h用梯度稀释和平板涂布法检测活菌数，获得活菌数为70亿／ml、67亿／ml、和66亿／ml的配方。2.2用3＃配方作为大规模中试发酵培养基在全自动发酵罐不中厌氧培养36h，结果活菌数为100～120亿／ml3 讨论3.1 本试验采用了正交试验设计法对培养基的原材料进行筛选，该方法能利用有限的试 验获得正确、全面的试验结果，加快了实验进程。3.2通过正交试验和发酵中试，活菌数超过了实验室培养的菌数，使基质转化率达到35％，降低了生产成本。工业培养基跟实验室培养基的区别:只是说原料粗糙度或者说是原料选择的区别，品级不一样而已，要看对于乳酸菌培养的要求了，比如要看是做高密度培养呢，还是直接就获取代谢产物，菌体离心收集后洁净度是否要高，还有就是选择的工艺是否时候使用低品级的工业培养基呢，这些问题需要综合考虑才能最后定论培养基的内容。