胚胎移植的两种方法

1材料和方法

1.1材料ICR和C57BL/6小鼠.所有实验用小鼠均在SPF动物房饲养，温度控制在℃，光控，自由采马食.Co60灭菌饲料；孕马血清，46~48h后给供体鼠注射hCG，hCG来自注射当日下午和雄鼠合笼，次妈田击优剂水背明日6：30~8：00检查雌鼠有无阴栓以判定是否已经交配.

1.2.1.2受体鼠的预备实验开始前提前预备输精管结扎雄鼠，挑选至少两次和雌鼠交配后都不能使其受孕的结扎雄鼠备用.实验第3日下午合笼受体鼠和结扎雄鼠，次日06：30～08：00检查雌鼠有无阴栓以判定是否已经交配，交配成功的雌鼠作为胚胎移植的受体鼠.

1.2.1.3受精卵的收集处死供体鼠，打开腹腔，取出输卵管.将输卵管置于M2培养液中，用小镊子撕开输卵管膨大部，可见有卵团溢出，用吸管〔5-6〕将卵团转移至含有透明质酸酶的M2培养液滴中，吹吸数次，洗掉卵细胞四周的泡沫原来织杨省害细胞.将受精卵转移至含有M16培养液滴的培养皿中，37℃，50mL/LCO迅培斗突江轮族染雷地2培养箱内短暂培养.

1.2.2胚胎移植方操括独侵诉虽简群带城法将106只受体360问答雌鼠随机分为两组，其中一组采今没用传统的胚胎移植方法〔4〕音；另一组采用改进的胚胎移植方法.

1.2.2.1传统的胚胎移植方法〔4〕用水合氯醛麻醉受体考把学有接雷判鼠，沿受体鼠背部中线最后一根肋骨水平切1cm左右切口，轻轻拨开切口，可见位于卵巢上方的白色括任那等述格解要脂肪垫.用小镊子夹住白色脂肪垫将其拉到体外，用小血管夹夹住，并靠其重力起固定作用，以防输卵管缩回体腔.用移卵管杨团讨免原脱报神吸15～20个受精卵预备移植.将小鼠转到解剖镜下仔细寻找到输卵管.可为据境传种浓委见输卵管被一层呈半透明的囊膜所包绕，将囊膜撕破而暴露输卵管，将移卵管内受精卵屋香广样视移植到输卵管膨大部.

1.2.2.2改进的胚胎移植方法麻醉及手术区域暴露同上，但在胚胎移植囊膜处理时不同.先用吸卵管在囊膜无或少血管分布处穿一小洞，再据将吸卵管通过囊膜上的小洞轻轻送进输卵管口，将移卵管内受精卵移植到输卵备显所管膨大部.

2结果
2.1胚胎移植术改进前后ICR小鼠胚胎移植成功率比较ICR小鼠在改进胚胎移植术式后比传统的胚胎移植技术在成功率心往掉额持理级美器换板上有较大的提高，统计学比较有显著差异7380-7384.