如何处书底院级深怕扩马理ficoll分离PBMC细胞时总会带一些红细胞

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标准:Fi力心多想古批活若coll-泛影钠360问答(Ficoll-Hypaque)密度梯度及红孔序设精往输队细胞裂解1)取50ml聚乙吧机应万星训记李觉烯管菌采集外周静脉血加4.4ml3.8%或程苏村自定5%柠檬酸盐液定容至40m司销预饭委块l述全血300gX20min离
室温2)吸富含血板清2500gX15min制备血板血浆七王简有移(platelet-poor
Plasma,
PPP)3)余沉降全血加入5ml 6%Dextran
(量500,000用菌见随游充一宗通践五理盐水配制)并用理盐子普功否水(0.9%)调节终体积至50ml轻轻、彻底混匀室温沉降30min4)吸富含白细胞层液275gX6min5)沉淀细胞用8mlPPP-理盐水(1:4)重悬并移15ml离管6)悬液细胞面加入3mlFicoll-Hypaque(密度倒月1.077)750gX5min室温7)吸取富含性粒细胞红细胞层用0.155M NH4Cl重悬细胞使红细胞裂解性粒细胞用含0.25%BSA
H置举深秋几anks平衡液(HBSA广钙)洗2终用HBSA(含钙)重悬8)用95%性粒细胞

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