RACE引物怎么设计

RACE引物怎么设计啊,具体点哈,比如引物长度,退火温度,GC含量,还有有什么注意事项
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回答者:网友
请参考Invitrogend 试剂盒的手册。我在设计引360问答物的时候采取一下的方法:
1。人工序列 YYYYYYYYYYYYYYYYNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN志印争印永源NNNXXXXXXXXXXXXXXX
其中Y代表Ada超收第植ptor上的引物,N代表未知序列,而X则代表已知的序列(引物位置)。
2. 然后用软件设计。记得要至少设计2个(nested). 要求和平时做PCR的引物基本相同。

http://tools.invitrogen.com/content/sfs/manuals/generacercdna_man.pdf

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