如何用流式细胞仪检测转染细胞的效率？
我想用流式细胞仪检测转染细胞的效率，转染细胞会发绿色荧光，问题一、步骤是不是这样的：1.收集细胞:用胰酶(0.25%)消化转染的细胞,加PBS，将细胞吹打形成单个细胞,离心800r,5分钟 .弃上清。再用PBS重新清洗1次。2.调整细胞密度为1X10*6/ml,上机检测。以未转染的细胞作为阴性对照。问题二、是否需要用预冷的1%多聚甲醛固定？
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回答者：网友
1. 阴性对照最好用转染无GFP载体的细胞，因为转染可能会改变细胞的自发荧光本地 2. 确保阴性对照和实验细胞的浓度相同，具体多少倒是无所谓，不要太稀释就好 3. 上机前，用细胞滤网过滤掉大块未消化的杂质 4. 不要固定，GFP固定后荧光强度会下降。
