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【放射性配体与受体结合率的判断】一般通过放射性配基与受体结合分析,进行判断。放射性配基与受体结永解织还合分析简称为受体放射分析,它是应用放射性核素标记配基与特异受体相结合,研究受体的亲和力和受体的数量,以及研究受体亚型的常用方法。
1、原理:
(1)放射性标记配基(激动剂或拮抗剂)和组织、细胞,或含有受体的制剂一起温育,使受体和配基充分结合,形成受体-配基复合物来自,终止反应后,用过滤或离心360问答的方法除去未被结合的标记物了本落失往境响快怎进,测定滤膜或沉淀物中的放射性,掉征言类示座我营滑胞县即可计算出和配基结合的受体的量。 (2)放射配基与受体制备物(含受体的组织或细胞制备物)作用时,其结合形式有两种,一种是配基与受体的特异性结究表若考承足合,其特点是亲和力高;且由于受体有限,故具有饱和性。另一种是配基与受体制备物的非受体分子的结合,称为非特异性结合个度著补杂广之息此责各。其特点是亲和力低但结合点多,不易饱和。用放射性配基研究特异性受体时,必须设法减除非特异性结合。一般采用的方法是制备总结合管和非特异结合管,两者计数之差即为特异性结合量。
2、计算方法:将督是色苏型吃片钟干西局特异结合计数除以和配基结合脚换除清制何如盟帮改镇的受体的量得到的百分比,就是放射性配体与受体结合率。
(1)总结合管:将放射性配基与受体制备物反应,除去游离的放射性配基,测定结合的放射性配基的计数,(其中包含特异性结合与非特异性结合,称为总结合)。
(2)非特异性结合管:将大量(一般为500-1000倍)非标记特异性配基温环提英船打内际百知西与标记的放射性配基相混,然后共同与受体制备物反应。由于非标记配基与标记配基两者比例悬殊,所以受体几乎全部被非标记配基饱和,标记配基只能与组织制备物中的非特异结合位点结合。这时算罗随二最测出的标记配基的结合量,反映的是非特异结合量。用总结合管的计数减去非特异结合管的计数,即可得到特异结合计数。