知道RNA浓度,反转录时怎么计算加的模板量呢 ,RNA浓度单位是ng/ul 模板的加入量单位为ug,还有PCR也是ug
我的RNA浓度是1749.91ng/ul 反转录试剂盒要求加1ugRNA怎么算呢 ,有人说加1ul就好了,会不会太少了 ?然后后面这个带就暗了呢 ?还有PCR时也要求加<1ug的模板,这些之间有什么关系吗 ?怎么计算呢?我没做过我没实验室也一直没人做着方面 所以问了些很幼稚的问题 谢谢你了
最佳答案
回答者:网友
呵呵,还在纠结这个问题呢?
这样告诉你吧,加1~10ug对实验结果其实没什么影响,这是经验之谈。
回答
其他回答
首先,你反转录是打算做什么实验?另外,反转录的产物跑普通的agarose胶没有任何意义,每种nRNA的长度都不同,反转录出来的产物也是长度不同的cDNA,你看到的两条比较明显的条带应该是18s和28s的带,其它的应该是一片smear
回答者:网友
其他回答
看你的结果,有几种原因:1,模版浓度太低;2,上样量太少;3,缓冲液有问题。你的RNA浓度是1749.91ng/ul ,也就是1.74ug/ul,因此加入1ul的RNA也就差不多是1ug的量。
回答者:网友
其他回答
你用的RT-PCR试剂盒不会是专门为后续qRT-PCR设计的吧?如果这样的话,还是用专门的定量跑,电泳跑的话效果肯定不好的。。。
回答者:网友