pTrcHis表达载体在宿主菌细胞表达外源蛋白具有哪些优点

pTrcHis载体是来由pBR322质粒衍生而来的表达载体,设计用来在大肠杆菌中进行重组蛋白的高效表达和纯化。

载体上的Trc启动子和rrnB抗终止区使得高水平蛋白表达成为可能.Trc启动子由Trp启动子的-35区域和Lac启动子的-10区域共同组成。pTrcHis载体同时包含有一个LacIq基因，该基因编码了Lac启动子的抑制蛋白。LacIq基因的存在使得宿主菌是LacIq+还是LacIq-都可以高效抑制插入基因的转录。

进行蛋白表达时，大肠杆菌需要生长到对数生长期，然后加入1mM IPTG，去除阻遏蛋白，诱导表达。载体上的迷你顺反子结构能够增强插入基因的转录水平，从而高水平表达目的蛋白。DNA插入片段位于载体表达片段下游，在其上游有一个N-端融合表达多肽序列，该序列包含有ATG起始密码子，6xHis标签，T7噬菌体10号基因的翻译增强子，X press抗原表位，肠激酶酶切识别位点。

目前常用的pTrcHis载体有pTrcHis A，B，C  以及pTrcHis2 A，B，C。

综上所以可以看到pTrcHis载体表达的外源蛋白带有N端His，N端EK蛋白酶酶切位点。这使得该载体表达的蛋白可以轻松使用Ni柱纯化，并且很方便 使用肠激酶切除多余的上游多肽。

下图是pTrcHis A载体图谱，请参考。

pTrc His A载体的详细信息可以参考载体网页：

http://www.***.com/zaiti/dachang/pTrcHisA.html