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回答者:网友
传播:写明ATCC完成生长培养基:这个细胞系的基础媒介是ATCC-formulated杜尔贝科修改鹰的媒介,目录30 - 2002。完整的生长培养基,添加以下组件基础培养基:胎牛血清的终浓度10%。
大气:空气,95%;二氧化碳(CO2),5%
温度:37.0°C
接种:协议:myoblastic人口会迅速耗尽,如果文化可以成为支流。
myoblastic细胞,防止损失,文化应该是亚文化成为支流,之前和线应该定期recloned选择myoblastic细胞。
删除和丢弃培养基。
简单冲洗细胞层的0.25%(w / v)胰蛋白酶- 0.53毫米EDTA溶液移除所有血清含有胰蛋白酶抑制剂的痕迹。
增加2.0到3.0毫升瓶Trypsin-EDTA解决方案,在倒置显微镜下观察细胞到细胞层分散(通常在5到15分钟)。
注意:为了避免凝结不搅拌细胞按或摇动烧瓶等待细胞分离。细胞难以分离可能放置在37°C,便于传播。
增加6.0到8.0毫升的完整生长介质和吸入细胞被轻轻移液。
添加适当的整除新文化血管细胞悬液。
孵化文化在37°C。
Subcultivation比率:Subcultivation建议1:2的比例为1:4
中更新:每2到3天
保存:冷冻介质:完整的生长培养基补充5%(v / v)DMSO溶液
储存温度:液氮气相