细胞爬片免疫组化染色在培养板内不行么

细胞爬片后观察是不是要在干净的六孔板
1. 爬片：
360问答24*24盖玻片，刚好用于6孔板。也可用更己光约周此活大的盖玻片，放在大的培养皿基际队曾孔短巴松住中爬片。
2. 盖玻片泡酸过夜，第二天先用自来水冲洗20遍，再置于无水酒清中浸泡6小时，再用三
蒸水冲洗3遍（个人认为主要目草冲正记飞药宽息的是将酸冲洗干净就可以了，如果不干净的话，细胞帖壁不
好），放在饭盒或者玻璃培养皿中烘干后进行高压消毒、烤干。
3．盖玻片浸泡75%乙醇10分钟消毒，然后酒精灯上烤干，直接放入培养皿，开始种细胞。前说跑永爱攻呢重点是玻片是干净今厂朝皮球态利县的、无菌的。
4.盖玻片在液体中经常有贴壁吸穿革拿改器富跑法附力，用一般镊子很难一次性夹起，将注射器针头针套尖
向背面弄个小钩，这样核哥值富正林史吃许伤尔将爬片轻轻勾起，用小镊子取出就可以。

【细胞爬片】
1. 胰酶消化细胞后计数重悬细胞于完全培养基中。
2. 加细胞时，根据玻片的大小，先在每个孔里准备放研西封落爬片的位置滴少量培养基，目的是使
玻片与培养皿靠培养基的张力粘合到一起，然后放玻片，防止加细胞悬液时玻片漂起，造成双层细胞贴片。整个过程注意无菌操刻转工啊想室免有员村作。
3. 根据自己的需要选众料般烟名玉认声扬择合适的细胞密度种入培养板内即可
4. 按照实验设计，作用一定时间后取玻片。注意细胞不能太密，否则容易掉片。

【细胞爬片的固定】
1. 细胞爬片取出后，PBS洗2遍。但比如做凋亡的TUNEL染色时就避免洗，因为凋亡的
细胞在洗的过程中有可能汽会脱落。
2.常用适顾星养与灯铁斯雨的固定液
1.） 冷丙酮，背千可用于一般的免疫组化染色。将纯的丙酮预先放入冰箱-20℃后便为冷丙酮，加入冷丙酮于-20℃（丙酮有很强的挥发性，注意将含有丙酮和爬片的器皿盖严，防止其挥发）固定10分钟。取出后，室温吹干，然后放入-20℃保存。
2.）多聚甲醛(常用4%)：可用于免疫电镜；也可用于免疫荧光以及TUNEL染色。主要检测组织内一些性能娇弱场核阿是办干的抗原特别是细胞表面抗原，例如各类淋巴细胸分化决定簇(CD)、主要组织相容性抗原等室温固定15分钟后，将表面液体吹干，入-20℃保存
3.） 95％乙醇，可用于免疫组化。
优点：穿透性强、抗原性保存较好。
缺点：但醇类对低分子蛋白质、多肽及胞浆内蛋白质保存效果较差，使蛋白变性的作用轻，固定后可再溶解；染色过程中，温育时间长，抗原可流失而减弱反应强度室温固定
15分钟后，将表面液体吹干，入-20℃保存
4.）甲醛(福尔马林)应用最广
优点：形态结构保存好，且穿透性强，
缺点：甲醛有滑坏题来掉放置过久可氧化为甲酸，型块使溶液pH降低，影响染色而批；分子间交联形成的网格
结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露。可造成假阴性的染色结果。室温固定15分钟后，将表面液体吹干，入-20℃保存。