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杂
360问答交瘤细胞的制备
1. 骨
口扩罪剂准府热笑响某管髓瘤细胞的准备
选
择生长状态良好的细胞，浑圆透亮，大小均一，边缘清
晰，排列整齐，呈半致密分布。弃上清，以不完全培养基洗涤一次后，用10mL不完全培养基将骨髓瘤细胞（SP2/0）轻
轻吹下。2. 脾淋巴细胞的
准备a、取加强免疫后3天
认点右情使法德家整导的小鼠，摘除眼球采血供分离阳性
血清。b、颈脱位将小鼠致死，用75%酒精消毒体表5min，随即放入超净台内
纪迫手普思小鼠解剖板上，左侧卧位，用7号针头固定
四肢。c、无菌打开腹腔取出脾脏，用基础培养基洗涤，并仔细去掉周围附着的结缔组织。
d、随后将脾脏转移到另一个盛有DMEM
间民齐什战牛的平皿中。以弯头针头压住脾脏，用小针头在脾脏上插孔，并用镊子挤压，使脾细胞充分释放，制成脾细胞
悬液。3. 饲养细胞的制备
取一
参史只健康的ICR小鼠，摘眼球采血
，颈脱臼处死，体表消毒和固定后，从大腿上剪开皮肤，暴露腹膜，酒精棉球消毒腹膜。用10mL注射器，12#针
待哥虽头，注射5-10mL HAT
模字迅培养基到腹腔，右手固定注射器，左手持酒精棉
优理袁动随位审护取球轻轻按摩腹部，抽回腹腔内液体，注入已准备好的容器中。
4. 细胞融合
a、将上述制备的骨髓瘤细胞与脾细胞混合于一支
50mL的带盖的离心管中，1000rpm离心10min，上清
要充分吸净，以免影响PEG的作用
总继聚操单杨呼机诗践结。
b、将融合管置于
手掌中，轻轻振荡底部，务使两种细胞充分混匀。g、5d后用HAT培养基换出
一半培养基。
