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罗丹明123染色检测线粒体膜电位
化学名:Rh123罗丹明123
别名: Rhodamine 123; Rh123
分子式:C21H17CLN2O3
分子量:380.82
配制:罗丹明123粉剂用甲醇配成1mg/mlde储备液,染色时用DPBS缓冲液将其稀释为所需浓度
保存:冰箱-20度避光
一、检测原理:
罗丹明123(Rhodamine 123)是一种可透过细胞膜的阳离子荧光染料,是一种线粒体跨膜电位的指示剂。其在正常细胞中能够依赖线粒体跨膜电位进入线粒体基质,荧光强度减弱或消失。而在凋亡发生时,线粒体膜完整性破坏,线粒体膜通透性转运孔开放,引起线粒体跨膜电位(ΔΨm)的崩溃, Rh123重新释放出线粒体,从而发出强黄绿色荧光,可用荧光显微镜、荧光光度计或流式细胞仪检测,通过荧光信号的强弱来检测线粒体膜电位的变化和凋亡的发生,可用于培养的细胞或从组织中提取出的线粒体的膜电位检测。
二、使用方法:
1.细胞染色及分析
(1)培养细胞1×106/mL重悬于培养基中;
(2)加入罗丹明123染液0.1μg/mL~50 μg/mL(根椐细胞种类不同而浓度不同,一般3~10 μg/mL);
(3)37℃,5% CO2细胞培养箱孵育1~30 min(根椐细胞种类不同而不同,一般10 min);
(4)离心以培养基洗细胞两次;
2.组织提取的线粒体染色及分析