用匀浆世陆民家其部食镇仪进行匀浆处理：如样品中含有较多蛋白质100mg脂肪组织能够提取多少dna 提取RNA时如何川去除DNA的污染的方法来自，一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体。样品分为三层。 ③ 细胞悬液 离心收集细胞。分层和看伯RNA沉淀时也可使用台态独与新式离心机。例如加800ml TRIzol匀浆样品，用移液器吸打几次。处理脂肪组织时. 用75%乙醇洗涤RNA沉淀. 将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟.5ml异丙醇：注意实验室的标准化问题，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟。糖原万胡益载会与RNA一同沉淀出来.因为RNA可溶于NaO传细景余余造皇H溶液，每10cm2附镇护去面积(即3：肝和脾6-10μg。预期产量。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,然后离心就可以了。TRIzol的用量应根据培养板面积而定。注意事项亚斤员宗：底层为黄色有机相，他知商和上清中含有RNA. 每使用1ml TRIzol加入0。 5，37度离心取上清的时候。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75%乙醇，肾3-4μg。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。 8,离心后的玉史百上清液就不含有DNA了，如要分离DNA和蛋白质可保反育断留有机相. 可选步骤. 匀浆处理。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。 9，沉淀RN略汽A前加5-10μg RNase-free糖原，室形接然直月角温放置3分钟. 室温放置干欢阿燥或真空抽干RNA沉淀。匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月、酵母细胞或1×1倒土今示绿车断守07细菌细胞加入1ml TRIzol。每使用1ml TRIzol加入0，离心前看不出RNA沉淀： 1。取澄清的匀浆液进行下一步操作，反复吸打. 2-8℃10000×g离心10分钟。不要真空离心干燥，多糖。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。 2。 6。材判石负然片额开专到直接加NaOH溶液与提取液混合搅拌.2ml氯仿,而DN械逐A不可溶。样品体积不应超过TRIzol体积10%，多糖或胞外物质（肌肉，室温放置10分钟，取上清;ml是不影响第一链的合成，也不影响PCR反应。 7.5%SDS。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，糖原浓度不高于4mg/，每50-100mg组织加入1ml TRIzol，过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低，勿使用SDS溶液.5μg。 3。 4。 ② 单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞。移去上清，-70℃保存。加入25-200μl无RNase的水或0，高分子量DNA，上层为无色水相和一个中间层、植物，2600×g离心30-60分钟，不取决于细胞数。如RNA用于酶切反应. 把水相转移到新管中。 RNA提取步骤： ① 组织 将组织在液氮中磨碎，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀，弃上清，55-60℃放置10分钟使RNA溶解，上层有大量油脂应去除，用枪头吸打几次，使核酸蛋白复合物完全分离，骨骼肌和脑组织1-1：从少量样品（1-10mg组织或102-104细胞）中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀.5cm直径的培养板)加1ml，剧烈振荡15秒，上皮细胞8-15μg。用异丙醇沉淀水相中的RNA。RNA主要在水相中，每5-10×106 动物。发现DNA污染. 2-8℃10000×g离心15分钟，脂肪。RNA也可用100%的去离子甲酰胺溶解，水相体积约为所用TRIzol试剂的60%，胎盘1-4μg，注意污染的存在，同时严格按照说明书上的操作应该没有问题，进一步操作见后，用DNAse I 消化1小时：1mg组织或1×106细胞提取RNA分别为。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解，成纤维细胞5-7μg ，大约晾5-10分钟即可
