原代来自肝细胞中分离死细胞和活细胞

我在培养原代肝细胞的时候,活率很低,看文献有用60%percoll分离活细胞和死细胞的,用了那个方法,但是细胞都浮在上层,请问这个方法活细胞是下层还是上层?有什么推荐的更好的方法么... 我在培养原代肝细胞的时候,活率很低,看文献有用60%percoll分离活细胞和死细胞的,用了那个方法,但是细胞都浮在上层,请问这个方法活细胞是下层还是上层?有什么推荐的更好的方法么?谢谢啦。 展开
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最佳答案

回答者:网友

其实很简单,对于成年360问答大鼠而言,注意下面几项即可:

 1.两部灌流法的灌流液,配改基把工希岩止ph值,氧气等因素,以及灌流时间很重要

 2. 如果血细胞去的非常干净,可以不用序异间烟控紧货脱使percoll分离

 3,用低速离心(50g 2 min),死细胞在上层。

 4. 台盼蓝检测后基本95%以上活性。我分离的通常在99%以上活性。肉层侵觉得定费英拉成鼠肝细胞元代培养很难增值,但是维持1个月没问题。

我曾给你回复过一次,你没反应。这是最后一次。看看我培养的大鼠原代细胞图片(48小时后),是不是比文献上发表的都漂亮。

哈哈

祝实验顺利!


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