尝试克隆一个1Kb的基因，测序后发现丢失21个碱基，这是为什么啊?

每块板都挑了几个克隆体，小提后，酶切检测方向，都是对的，送去测序后发现在相同位置都少了20-21个碱基，不知道什么原因。克隆基因的时候已经使用高保真酶了。