GST标签凝血酶切不掉

1.透露条件不足，包括在什么温度下进行。对照蛋白酶切条件是否与目的度蛋白的酶切条件相同，包括溶液的总体积，蛋白浓度。
2.如这些条件都相同，且蛋白已复性，那么有可能是蛋白构像导致酶切识别位点被遮态天某环蔽。thrombim无法合探旧胞州怀育与识别位点结合，导致最后车造治逐吧面卫挥传够观无法酶切。
3.实验方案，可将蛋白浓缩后（具体浓度取决于蛋白的可溶性），体叶增天守无积在200ul左右（可适当提高thrombim在酶切体系中的浓度），以温度（酶浓度）为梯度进行酶切，酶切一般2天内，SDS-PA即轻林值列因周怎GE观察结果。