先克隆目的基因，比如PCR扩增。或者直接从其他载体酶切纯化
找到你所要的载体，一般可用TOPO TA载体来直接连接PCR产物。或者使用相应的酶切对应载体
完成连接
转染细菌，比如感受态的E coli
扩增，培养细菌
分离提来自纯载体
