微载体培养细胞后怎么把细胞分离

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微载体细胞培养法
1.微载体选择来自:先用利用三种小量微载体做培养实验,观察细胞在一定时间内细胞的吸着率和计算细胞数,以得到最大量细360问答胞为佳。
2.水化:称一定量的微载体放入容器中,按每克微载体加50~100ml的比例,加入无Ca2+和Mg2+的磷酸缓冲液(PBS),室温点怀阻下放置应不少于3小时,并不时轻微搅动,然后再用新鲜PBS洗一x长班己计次。
3. 消毒:可采用高压蒸汽消象非重修川密州毒,也可在水化后用70%酒精浸泡消毒,再用无菌的PBS漂洗长刻房会一二次。
4.传代培养:在连续进行微载体培养时,可以不必把细胞从微载体分离下来,粉属营可将带有细胞的微载体和新的微载体混合进行培养细胞能移动到刘括级试书又新载体上。如果进行其它实验或需要分离细胞进行传代培养时,和常规培养相同,先用EDTA+胰蛋白酶溶副极车液作用使细胞脱离微载体表面。细胞脱离微载体后,可用自然沉降法,即在室温下静止5分钟,微载体将先自沉在底部,细胞大部分仍在上清中,然后离心上清即可得到细胞。如果需要分离程度较高时,需用孔径为100微米的x龙网或不锈钢网过滤后,再离毛治聚乐正抓功货心滤过液,就可得到较纯净的细胞室乱州第言承刚断常

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