酪蛋白分子量测定方法?

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一,凝胶渗透色谱GPC分子量测试,GPC分子量检测理论:凝胶渗透色谱[GPC(Gel Permeation Chromatography)] [也称作体积排斥色谱(Size Exclusion Chromatography)]是用溶剂作流动相,多孔填料(如多孔硅胶、多孔玻璃)或多孔交联高分子凝胶作分离介质的液相色谱法。体积排斥理论:解释凝胶渗透色谱中的各种分离象与事实比较一致,因此体积排斥理论已为人们普遍采用。即:它的分离基础主要依据溶液中分子体积(流体力学体积)的大小来进行分离。有限扩散理论,流动分离理论,分子热力学理论,二次排斥理论等。二,凝胶渗透色谱GPC分子量测试,GPC分子量检测的分离过程:凝胶渗透色谱的分离过程是在装有多孔物质为填料的色谱柱中进行的,一个填料的颗料含有许多不同尺寸的小孔(这些小孔具有一定的分布),这些小孔对于溶剂分子来说是很大的,它们可以自由地扩散出入。由于高聚物在溶液中以无规线团的形式存在,且高分子线团也具有一定的尺寸,当填料上的孔洞尺寸与高分子线团的尺寸相当时,高分子线团就向孔洞内部扩散。显然,尺寸大的高聚物分子,由于只能扩散到尺寸大的孔洞中,在色谱柱中保留的时间就短;而尺寸小的高聚物分子,几乎能够扩散到填料的所有的孔洞中,向孔内扩散的较深,在色谱柱中保留的时间就长。因此,不同分子量的高聚物分子就按分子量从大到小的次序随着淋洗液的流出而得到分离。三,凝胶渗透色谱GPC分子量测试,GPC分子量检测仪器构成:1)输液系统(包括溶液储存器、输液泵、进样器等)2)色谱柱系统(包括柱温控制箱)3)检测器(RI、UV等)4)数据收集及数据处理系统(包括模数转换器、计算机、打印机/绘图仪等)


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