做突变时为何要用PNK酶把引物磷酸化

在做定点突变或者序列插入之类的时候为什么要将引物的5’端磷酸化呢?本人是新手希望能得到大家的帮助,先谢谢各位了
网友 1

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回答者:网友
不知道你是用什么方法做的
我们一般有两种方法做点突变
而且都不用磷酸化的
一种是搭曾光编传担回谈引父绝冲桥法
这种方法用pcr把突变的基因片段拉出来
然后连误害排节久胡进载体
还有种方法
就是直接pcr在质粒拉一圈
这种方法用DpnI消化模板后
来自接转化就好了
两种都磁会率不要磷酸化

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