测定β-半乳糖苷酶酶活的具体方法

具体方法如下：
在冰上解冻样品，同时准备裂解液（见下面关于裂解液样品的收集和准备的注意事项）。
准备若干(至少每个样品3个和空白一支)透明的塑料比色皿，每支装有500μl的碳酸钠
终止液。你可以在比色皿上标明测试样品的名称和使用的时间。
在微量离心试管中加入如下试剂：磷酸钠盐缓冲液、ONPG溶液、 镁离子溶液。
把反应混合物放置在37°C的水浴中或者加热垫上预温育。
一旦预热后，加入如下物质：60μl 细胞萃取物
留心观察每个反应试管里黄色（o-硝基酚）的出现，在适当的时间点，从每种反应混合
物中等量移取100μl的溶液，把它加到装有碳酸钠终止液的比色皿中。
7. 当完成所有时间点测定后，在420 nm处测光密度，记录吸光值，并且计算吸光值与时
间的斜率。斜率和β-半乳糖苷酶的活性成正比。注意：若在420nm处吸光值高于1.0，则不能采信。
8. 在计算其实际活性时，先制作o-硝基酚标准曲线图，然后根据样品的吸光值在曲线上找
出对应的浓度。