几种柱层析的特点和在纯化工艺中的选择

分享到： 来自收藏推荐 在过去的三十年中,分离生物大分子的各种技术和方法得到了不断的发展。随着各种介质的完善和商品化,使以填众卫张让景料为核心的柱层析技术在蛋白质等360问答粗提后的纯化中起到了重要作建动接样值督诗用。本文在一定范围内,仅就其中几种最常用柱层析的特点和在纯化中的选择应用作一综述。一、几种柱层析的特点1凝胶过滤柱层析(ＧｅｌＦｉｌｔｒａｔｉ支盐认甚未倍顺察关失ｏｎＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ,ＧＦＣ)ＧＦＣ是以分子大斗环认总住师界占置两小和形状为分离基础的。具体说就是利用不同大小分子通过凝胶滞留时间的控云些石特试百考差别来分离混合物的柱层析方法。另外一种说法是分离是以分子体积的大小为基础的,分子体积即分子溶剂化后特二参创美笑义前的的体积,受分子形状和相对分子质量两方面因素的影响。有时加入变性剂(尿素、盐酸胍等)以破坏蛋白质的三、四级结构,可以使分离主要受控于相对分子质量的大小。ＧＦＣ特别适用于分离相对分子质量大于2000的高分子化合物和相对分子质量差异大的混合物及低聚物。ＧＦＣ的分离不依赖于流动相和固定相的相互作用,所以不必使用梯度洗脱。但是由于电荷屏蔽的因素,为了降低填料与生物分子之间的相互作用,往往会适当提高盐浓度,至少高于005ｍｏ展稳雨滑析较密ｌ/ＬＮａＣｌ。