最佳答案
回答者：网友
ni柱中的氯化镍可以与有年皇散his（组蛋白）矛欢课标签的蛋白结合，也可以与咪唑结合。
步骤是：过柱子前可以选择ni柱重生，也总队九育江采就是往柱子里倒氯化镍，一个柱长体积就行了，然后平衡柱子，拿你自己的buff消义呢有略er，给蛋白提供最适的环境，我一般平衡4个柱长，然后蛋白上样，带议领答报正弦你可以让他自己挂，这样挂柱子的效果好一些测乡，如果流速太慢，可以加个恒流泵，但是一定不能太快，太快挂柱效果差，当然你也者可以选择循环挂柱，就是恒流泵的一头接你装蛋白的烧杯，从柱子中留下来的液体还用同一个烧杯接回去。挂完之后，按理想来讲，你的蛋白在ni柱中与ni就结合了，杂蛋白多数在烧杯里，留下来了，当然肯定有少量杂蛋白也挂上了，这时候你要梯度洗脱，拿咪唑和你的buffer配，一般从0
20mm
40mm。。。。100mm这样洗脱（当你不知道你的蛋白大概在什么时候出来的时候）我指的是咪唑的终浓度。咪唑加入之后，会和蛋白争夺与ni的结合位点，杂蛋白、你远织技半固玉的目的蛋白，会在不同的浓度被洗脱下来，洗完之后，你可以用400mm咪唑洗柱子，清理一切也旧蛋白，然后平衡几次，是否选择重生你自己定咯~然后放上20%乙醇保存柱子就可却以咯~
过的蛋白用不同的管子收下，然后sds-page检测在哪个管子里。
这是我的经验，楼主可以多方面参考下别人的。喜欢推荐我的答案哦，~\(≧▽≦)/山语美独持施防达石~
