A、限制性内切酶的活性受温度、pH的影响,A错误;
B、酶具有专一性,限制性内切酶只能识别特定的核苷酸序列,B正确;
C、限制性内切酶只能识别和切割DNA,不能识别和切割RNA,C错误;
D、DNA连接酶连接两个DNA片办阳针段酒上安段的两个核苷酸之间的磷酸二酯键,D错误.
故选:B.