组氨酸蛋白激酶

pet-32a的his tag分别在前面的trx蛋白c端以及你的目标蛋白c端，如果你的目的蛋白在构建载体的时候自己加了终止子，那么你的目的蛋白c端是没有his tag的，也就是说唯一一个his tag在trx与你的蛋白之间（pet32a是融合蛋白），这样，pet-32a提供的两个肽链内切酶（凝血酶和肠激酶）都是可以切掉的，当然，个人建议你用肠激酶，因为肠激酶酶切位点更贴近你的目的蛋白，而用凝血酶的话还有一个s tag。如果你在构建载体的时候，下游引物没有加终止子，那么你的蛋白的n端也会有一个his tag，这时候你需要用tagzyme了，这个酶专一性去除his tag的。