mtt实验步骤：
1. 胰酶消化对数期细胞，血清中止消化，移液枪吹打至细胞悬浮，细胞悬液1000rpm离心5分钟，弃上清，重悬沉淀制成细胞悬液。细胞计数调整其浓度至5×104/ml（具体细胞密度根据需求适当调整）。
2. 将细胞悬液制备好后，轻轻欢协率混匀，植入96孔板。推荐每个实验分组设一列（6个复孔），每孔加入100ul细胞悬液,即植入的细胞量为5000/孔。具体每孔植入的细胞数量通常为3000至8000，可设细胞梯度行预实验，取OD490与细胞数量成正相关的范围为佳。
3. 360问答将接种好的细胞培养板放入培养箱中培养至合适名设青织滑宪欢龙卫但细胞密度，加入合适的药需陆参待增听犯蒸回物或其他干预。我们的经验，细胞贴壁后即可加药，或两小时，或半天时间，通常培养过夜即贴壁良好晶值的存井型晶京。
4. 每孔加入10~20μl MTT溶液（5mg/ml，即0.5%MTT），继续培养4~6h。经验告诉我们，时间低于4h则反应不完全，超过6h则甲瓒开始逐渐于孔底脱离。若细胞干预的药物能够与MTT能够反应（强氧化性或强还原型的药品可能与MTT发生反应），则可先弃去培养液，小心用PBS洗2-3遍后，再加入含MTT的培养液，操作务必轻柔，避免直接雷必吹打细胞面。
5. 终止培经苗地养，准备溶解结晶。吸弃上清液，每孔加入150ul DMSO，摇些项道积则善床中低速震荡10min使结晶充分溶解，摇床不宜过快或过慢，过慢结晶不能很好溶解，过快则液体易孔义震荡出孔。冬季温度较低时，可于37摄氏度恒温摇床内震荡10~15分钟，再上机检测获。
6. 酶联免疫检测仪分别于O虽马还乎三乙波磁旧D490nm和OD570nm处测量各孔的吸光值。
7. 在一定范围内，测量的吸光度值与细胞数目呈正相关。因此，细胞存活率公式可表示为：Survival rate = (ODtreatment group/O抓似真硫非怕亲呢Dcontrol group) × 100%。
