设计实验方案鉴定大肠杆菌质粒转化后获得的菌落为阳性菌落。 菌株（DH5α），质粒（大小3500bp，抗性为抗氨苄青霉素），扩增引物M13（退火温度55℃，片段大小750bp）

1. 将质粒转入DH5α的感受态态细菌中，涂布于含有氨苄抗性的固体培养板上，过夜培养。2. 挑选单克隆，转接3-5ml含氨苄抗性的液体培养基，37度振荡培养10-12h。3. 提取质粒（步骤省略），并将质粒进行进行琼脂糖凝胶电泳，一般可以观察到2-3条带，选择其中最下面一条带（超螺旋形来自式）大小约为2000左右的笑即旧垂朝克隆。4. 以上述挑选的克隆质粒为模版，360问答以M13为引物，进行PCR检测（步骤省略，退火温度为55度），注意设置阴性和阳性对照。5. PCR产物，进行琼脂糖凝胶电泳，注意选择合适的DNA分子量Marker，比如DL2000。6. 扩展产物为750bp左右条带的即为正确侵又社载干立德路的克隆。



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