感受态细胞的制备

感360问答受态细胞的制备如下，
首先附进长极不敌细菌小量培养，从LB在牛供眼级孩胞花息掉续平板上挑取新活化的E.coliDH5a单菌落，接种于3~5mlLB液体培养基中，37"C180r/min振荡培养过夜。
然后，进行扩随击说及大培养，取细菌悬液1句伯势倍本述序阶ml,以1:100的比例接种于100mlLB液体培养基中,37C振荡培养1~2h至Asoo=0.5左右。
然后，收集菌体，将培养液转人离心管中，冰上放置10min,然后4"C5000r/min离心10min,弃上清加人1/10体积(10ml)0~4C预冷的无菌CaCl2企几(0.01mol/L)溶液轻轻悬浮细胞派指蠢，冰上。
然后，尘陪CaCl2处理菌体，放置1石想毛减评0min后,4"C5000r/孩min离心10min,弃上清液，加人2000p府章小众帝东溶路百句l预冷的无菌CaC12(O.0lmol/L)重新悬浮细胞，分装成100pl备用。
然后，感受态细胞的收集与分装，加入1600pl预冷的无菌CaCl2(土供儿O.01mol/L)和400pl无菌的70%甘油轻轻悬浮细胞。
最后，进行长期保存，直接校可临燃帝结味属加保存液2ml,冰上放置几分钟后，分装成100pl小份，逗皮液氨速冻10min后，在-70C下保存备用。