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对于石蜡切片：
1、烤片：60℃60分钟
2、脱蜡：二甲苯中Ⅰ脱蜡15分钟→二甲苯Ⅱ脱蜡15分钟→无水乙醇Ⅰ5分钟
→
无水乙醇Ⅱ5分钟→90%乙醇Ⅰ5分钟→90%乙醇Ⅱ5分钟→70％
乙醇5分钟→蒸馏水5分钟→蒸馏水5分钟。3、抗原修复：高压修复，事先烧开锅中的水，修复盒中加入0.01mol/l柠檬酸钠，pH6.0
(柠檬酸三钠3g,柠檬酸0.4g加入1000ml蒸馏水中)，上汽后加热10分钟，关火。修复盒取出，放入装有
六字自来水的瓷缸中缓慢冷却至室温
第顾保们极审卫稳。2.去除内源性酶：玻片取出放入湿盒，加3%H2O22(2ml H2O22加入18ml蒸馏水中，现配现用，避光)，室温孵育10分钟，
360问答PBS洗3次，每次5分钟。（也可不用去除内源性酶）。3.封
闭(Blocking) 加10%正常驴血清（原液10
0ul+900ulPBS,1ml够用30张
乱培银径未片子），室温孵育封闭30分钟。如果背景较高，可以4℃封闭过
能友场范常龙低散阻目流夜。不用洗，用滤纸吸干周边水分。从封闭开始
日令希代向善断令杆一所有的步骤，一定要注意样品的保湿，避免样品的干燥，否
逐似领被路首则极易产生较高的背
击且厚零封景。4.一抗孵育(Pr
imary antibody incubation) 参考一抗的说明书，按照适
当比例用免疫染色一抗稀释液（10%山羊血清PBS或1%BSA-PBS）稀释一抗。 立
即加入稀释好的一抗，4℃过夜，第二天取出复温45
分钟。PBS洗3次，每次5分钟。5.二抗孵育(Seco
ndary antibody inucubation) 按照适当比例用
犯因巴间统老宪斗数倒控免疫荧光染色二抗稀释液用
