试验步骤：
1、 将0.5-1.0g寡聚（dT）-纤维悬浮于0.1M的NaOH溶液中。
2、 用DEPC处理的1ml注射器或适当的吸管，将寡聚（dT）-纤维素装柱0.5-1ml，用3倍柱床体积的DEPC H2O洗柱。
3、 使用1×上样缓冲液洗柱，直至洗出液pH值小于8.0。
4、 将RNA溶解于DEPC H2O中，在65℃中温育10min左右，冷却至室温后加入等体2×上样缓冲液，混匀后上柱，立即收集流出液。当RNA上样液全部进入柱床后，再用1×上样缓冲液洗柱，继续收集流出液。
5、 将所有流出液于65℃加热5min，冷却至室温后再次上柱，收集流出液。
6、 用5-10倍柱床体积同航样效数让的1×上样缓冲液洗柱，每管1ml分部收集，OD260测定RNA含量。前部分收集管中流出液的OD260值很高复当越杨吸，其内含物为无P伤响整乎黄角乐oly(A)尾的RN是达A。后部分收集管中流出液的OD260值很低或无吸收。
7、 用2-3倍柱容积的洗甚台殖脱缓冲液洗脱Poly(A+)RNA，相希硫诉其海任吧分部收集，每部分为1/3-1/2柱体积。
8、 OD260测定Poly(A+)RNA分布，合并含Poly(A+)RNA的收集管，加入1/刘10体积3M NaAc（pH范测所5.2）、2.5倍体积的预冷无水乙醇，混匀，-20℃放置30min。
9、 4℃离心，10000g×15min，小心吸弃上清。用70%乙醇洗涤沉立朝全争包淀。[注意：此时团清发班手握沿正数移Poly(A+)RNA的沉淀往往看不到]。4℃离心，10000g×5min，弃上清，室温晾干。
10、 用适量怎据烧医问督皮觉兰慢础的DEPC H2O溶解RNA。 注意事项：
1、 整个实验过程必须防止Rnase的失鲁收图铁距污染。
2、 步骤4中将RNA溶液置65℃中温育然扬岩起升望齐克后冷却至室温再上样的目的有两令过个，一个是破坏RNA的二判方厂步晚义福级结构，尤其是mRNA Poly(A+)尾处的二级结构，使Poly(A+)尾充分暴露，从而提高Poly(A+)RNA的回收率；另一个目的是能解离mRNA与rRNA的结合，否金校都低查烈味施冲则会导致rRNA的污染。所以此步骤不能省略。
3、 十二烷基肌氨酸钠盐在18℃以下溶解度下降，会阻碍柱内液体度历课流动，若室温低于18℃最好用LiCl替代NaCl。
4、 寡聚（dT）-纤维素柱可在4℃贮存，反复使用。每次使用前应该依次用NaOH、灭菌 ddH2O、上样缓冲液洗柱。
5、 一般而言，107哺乳动物培养细胞能提取1-5μg Poly(A+)RNA，约相当于上柱总RNA量的1%-2%。
