泡菜的制作方法极其乳酸菌的分离实验结果

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一、材料、试剂与仪器
1.1 材料
萝卜、番茄:购于食堂
蔗糖,食盐:实验室提供
1.2试剂
番茄汁碳酸钙琼脂培养基:葡萄糖5 g,酵母膏留居承酒损倒指景3.75g,蛋白胨3.75 g, 磷酸二氢钾1 g,吐温80 0.25 ml,琼脂10g,番茄汁50 ml ,自来殖喜重造磁继沙水450 ml ,常铁效态丝规灭菌50min;
BCP琼脂培养基:乳糖 2.5 g,酵母膏1.然刚望收企层角余实5g,蛋白胨2.5g,琼脂10g,0.5%溴甲酚紫溶液5 ml,自然水500ml来自,常规灭菌50min;
1.3用具与仪器
标签纸,酒精灯,玻璃棒,量筒,移液管,烧杯,试管,500ml三角瓶,250ml三角瓶,培养皿,接种环,棉塞,牛皮纸360问答,纱布,电子天平,恒温培养箱,高压蒸汽灭菌锅,砧板,菜刀等。

二、实验步骤
第一阶段:泡菜制
(1) 选料:选择新鲜的萝卜不率领乙阶破日一根,洗净,切成3~5cm的长条放入灭菌后的三角瓶中,直至总体积的2/3左右。
(2) 加水:取含5%食害跟吗军妈尔脸讲盐和3%蔗糖的冷开水,加至容器的4/5的容积处,然后盖上橡胶塞。
(3) 保温:置28°C恒温箱中保温一周左右。泡菜时间以酸化阶双两地态银甚握单段为佳,若时间过长,则泡菜发酵已进入过酸阶段,不适宜分离检验站拿长投架医乳酸菌。
(4) 质量检验:一般倒皮少南溶的省通过感官辨色泽(浅黄、无太度挥破今介程赵耐水白花)、闻气味以及进一步测PH即可知泡菜的成熟度和质量优劣。
第二阶段:培养基的制作
(1) 番茄汁碳酸钙琼脂培养基的制作: 称挥区倍树州直取葡萄糖5g,酵母膏3.75g,蛋白胨3.75g,KH2PO41g,吐温80 0.25ml,琼脂1供海啊烟础0g,番茄汁50ml(用纱布挤),自来水450ml,PH7.0。然后放入高压灭菌锅中灭菌50分钟。
(2) BCP培养基的制作: 称取乳糖2.5g,蛋白胨2概另友.5g,酵母膏1.5g,琼脂10g,0.5%溴甲酚紫溶液5ml,自来水500ml,PH6.8—7.0. 然后放入高压灭菌锅中灭菌50分钟。
第三阶段:菌种分
(1) 浇注平板:将上述两种培养基各浇注三个平板。
(2) 平板分离:将优质的泡菜汁通过直接平板划线法分离出单菌落。
(3) 恒温培养:将苦工上述平板分别放入25°C、37°C恒温培养48h以上。
(4) 观察菌落:乳酸菌在番茄汁碳酸钙琼脂平板培养基表面只形成浅色的小菌落,但汁BCP琼脂平板培养基表面则可使紫色的培养基形成黄色包围圈。
第四阶段:菌种鉴定
触酶反应 厌氧菌一般都无触酶(过氧化氢酶),故用滴管把3%H2O2滴在菌落上,若无气泡产生,就证明该菌为触酶阴性。
注意事项:
(1) 制作泡菜的萝卜应洗净,但不可用开水烫过,不然可以使其内的乳酸菌致死。
(2) 三汽席卫流编践段根服读张角瓶中不宜留过多的空间,同时,在制作期米强给左理哥报露护间,不可经常打开橡胶塞,否则因氧气的过多而促使其中的白地霉等杂菌大量生产,降低质量。
(3) 因为泡菜是厌氧发酵过程,故应注意橡胶塞是否密闭。
五、试验结果的观察
泡菜汁通过平板划线法在番茄汁碳酸钙培养基上只形成了浅色的小菌落,而在紫色的BCP培养基上形成了黄色的包围圈。用3%H2O2滴在菌落上,无气泡产生。证明泡菜汁中得到了乳酸菌,并分离出来。
六、实验过程中所遇到的问题
(1) 在培养基灭菌时,塞子选用的是有孔的,导致在灭菌时培养基喷出,且拿出培养基后,没有及时的倒平板,使得培养基凝固。

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