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小麦叶片总抗氧化能力测定（FRAP法）
一、实验原理
FRAP法测定总抗氧化能力的原理是酸性条件下抗氧化物可以还原
Ferric-tri-pyridyl-tria-zi
待春异ne(Fe3+-TPT
钢去简移育找散祖院甲Z)产生蓝色的Fe2
因鲜每+-TPTZ，随后在593nm测定蓝色的Fe2+-TPTZ即可获得
样品中的总抗氧化能力。由于反应在酸性条件下进行，可以抑制内源性的一些干扰
因素。并且由于血浆等样品中的铁离子或亚铁离子的总浓度通常低于10μM，因此血浆等样品中的铁离子或亚铁离子不会显著干扰
张主孙钟显胞政FRAP法的检测反应。由
活属评有倍苦染龙历升尔于反应体系中的铁离子或亚铁离子是和TPTZ螯合的，样品本身含有的少量金属离子螯合剂通
亚注费常也不会显著影响检测反应。
Antioxidant
Fe3+-TPTZ（橘黄色）——————> Fe2+-
TPTZ (蓝色)二、实验步骤
1.FRAP工作液配制：
0.3 Mp
H3.6 醋酸缓冲液：0.364g无水醋酸
钠+3.2mL冰乙酸定容至200mL，用1
M HCl调节pH至3.6；
10mmol/LTPTZ溶液25mL：0.078g TPTZ用40
见展渐阶编界景贵mM 盐酸溶液定容至25mL；
20mmol/L FeCl3溶液50mL：2.78g用RO水定容至50m
稳道六石明刻L；
上述溶液以10:1:1的比例混合（现配现
用）。2.取叶片0.1
她角促浓长属福觉g，加入2.5mL蒸馏水研磨稍沉淀后取1.5
超成系气跳构mL12000g离心10min（4oC），取上清液。
3.在反应管中加入100uL上清液，再加入2.4m
而鲁L工作液，37oC条件下水
浴10min，于593nm处测定吸光度，
4.标准曲线
绘制：以0.1-1.6mmol/L的FeSO4的标准液替代样品绘制标准曲线。[2]
