苏丹三染色
一)实验目的:实验目的:
1)了解小鼠肠系膜的剪取方法,熟悉小鼠结构。2)熟悉并掌握苏丹三染色的原理及其步骤。
二)实验原理:
脂肪和苏丹染液有比较强的亲和力,苏丹3遇脂肪变橘黄色。(即萃取原理)苏丹Ⅲ是弱酸性染料,呈红色粉末状,易溶于脂肪和酒精(溶解度为0.15%)。苏丹Ⅲ是脂肪染色剂。适合用于生物脂肪材料的鉴定,可在光学显微镜下看到被染成橘黄色的小粒。苏丹是鉴别脂肪的染液,由NAOHCU(SO)4组成。
三)实验试剂及器材:
1、器材器材:器材镊子两把显微镜托盘一个剪刀一个把2、试剂试剂:试剂苏丹三染液蒸馏水70%乙醇
滴管一支
四)实验步骤:实验步骤:
1、断头法处死小鼠,置于解剖盘中,剪开腹腔,用镊子提起小肠将盖玻片紧贴于肠系膜,用剪刀连同盖玻片和其上粘的肠系膜取下,反扣于已滴加甲醛钙的载玻片上,固定20min。2、用吸管吸取蒸馏水滴入载玻片与盖玻片之间冲洗掉甲醛钙溶液。3、用70%乙醇溶液代替蒸馏水重复步骤二的操作,冲洗。4、滴加苏丹三于盖玻片上,染色30min。5、吸去载玻片上溢出的染液,擦净载玻片表面及周边,显微镜观察。五)实验结果:脂肪细胞呈圆球形,内充满橘黄色之类物质,细胞外液有分散的橘黄色的圆脂肪滴。如下图所示:
放大典型的油煎蛋形,黄色的是油脂粒,周围的是细胞质。
六)结果分析:结果分析:
结果脂肪细胞变为橘黄色细胞染色效果较为明显细胞内圆圆的黄色物质