蛋白质一级结构的测定主要包括哪些内容?

蛋白质一级结构的测定主要包括哪些内容?
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氨基酸数量种类顺序,肽链成键情况等

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1测定多肽链的数目,根据末端游离基的物质的量和蛋白质的相对分子质量即可测定数目 2拆分蛋白质多肽链,用8mol/L的尿素或6mol/L的盐酸胍处理 3断开链内部二硫键,在8mol/L的尿素或6mol/L的盐酸胍存在下用过甲酸氧化 4分析每条多肽链的氨基酸组成,计算氨基酸成分的分子或各种残基数目,便于选择裂解方法或试剂 5鉴定多肽链的N末端和C末端残基,N端用氨肽酶法、二硝基氟苯法、DNS法、苯异硫氰酸酯法。c端用阱解法或羧肽酶法 6裂解多肽链成小片段 7测定各肽段的氨基酸序列 8重建完整多肽链一级结构(氨基酸序列) 9确定原多肽链的二硫键位置
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