用Ni亲和层析柱纯化His标签融合蛋白时需要注意哪些来自事项

网友 1

最佳答案

回答者:网友
不是绝对的,两种方法其实都差不多。但是柱切和洗脱后酶切松载还是有不同的。柱切比较方便,酶切之后直接收流穿的部分就是360问答目的蛋白。缺点是在洗脱之前不知道蛋白产量,可能努力了半天什么都没有,而且有些蛋白不稳定,可能在柱切过程中沉淀在柱子上了。洗脱后再切,比较直观的检测初步富集的蛋白量,再危输镇义何帮持决定加多少酶,而且能直观的检测酶切效率,确定是酶切之后要多一个去标签的过程。

我来回答