酶联免疫试剂盒
请问只要是用ELISA试剂盒做的实验项目都是属于免疫专业吗?... 请问只要是用ELISA试剂盒做的实验项目都是属于免疫专业吗? 展开
最佳答案
回答者:网友
酶联免疫试剂吸庆封针伟王盒是基于经典酶联夹心技术原理,能测量人促卵泡素(FSH),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。
酶联免疫试剂盒工作原理
促卵泡素(F360问答SH)是动物脑垂体分泌作用于卵巢卵泡生长、发育、分化、成熟和排卵的重要繁殖激素.由千特材于是生物大分子,不能透过细胞膜,FSH必须与靶细胞膜上的促卵泡素受体(FSHR)结合,经过受体介导将信息传递到靶细胞内,才能发挥其生物学功能.所提供的ELISA
Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒(ELISA)。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体急右婷,经生物素(biotin)标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈眼权静镇放时正相关。
酶联免疫试剂盒工作环境
1.
37℃恒温箱。
2.
标准规格酶标仪。
3.
自动洗乙语危针企音出立爱面整板机。
4.
单通道或多通道可调节移液器以及其吸头。
5.
蒸馏水,容量瓶等
6.
干净的试管和Eppen继各略候书形液dof管
酶联免疫试剂盒操作步骤
1.
确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目。
2.
将倍比稀释的标准品各0.1ml依次加入一排7孔中皮评么德却改就,1孔只加样品稀释液的作为对照。处理后的标本按100ul每孔加入。
3.
酶标板加上盖,37℃反应90分钟。
4.
反应后用自动洗板机吸去酶笑着站积脸某孩毫标板内的液体;或甩去酶标板内液体,再对着吸水纸拍几下。烟令措年导奏送如洗涤2次。
5.
将准备好的生物鱼雨践用冲计素抗体工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反应60分钟。
6.
0.01M
TBS或0.各愿01M
PBS洗涤3次,每次浸泡1分钟左右。
7.
将准备好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反应30分钟。
8.
0.01M
TBS或0.01M
PBS洗涤5次,每次浸泡1-2分钟左右。
9.
按每孔置游气了务还冷0.1ml依次加入TMB显色工作液,37℃避光反应,反应过程中,要经常的观察,当肉眼可见标准品的前3-4孔有
明显的梯度蓝色,后3-朝松据土流王始决传害实4孔差别不明显时,即可加入TMB终止液0.1ml/孔。(显色反应最长不要超过30分钟)。
10.
用酶标仪在450nm测定O.D.值。
11.
根据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度。用汉户也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了N倍,其实际浓度应该×N。
参考标抗资料:
http://www.***.com/weikang-Article-14759/