最佳答案
回答者:网友
1. 从大鼠体内取肾脏速度要快,严格无菌操作。
2. 提取出来的肾小球经IV型胶原酶消化要摸索酶用量,消化时间,肾小球不易消化头。
3.肾小球接种时,可在培养瓶表面用多聚赖氨酸,胶原,纤连蛋白等包被。我做的前几次,也没有污染,主要问题是肾小球不贴壁,后来一次用多聚赖氨酸包被就成功了。
4.严格前3天不动培养瓶,可在第五六天首次换液。
5.有细胞爬出,贴壁生长后,千万要有耐心,我的第一瓶原代细胞张了整整31天。
6.传代后的系膜细胞长得就挺快了,千万别忘了冻存呀。
7.用到10代左右,细胞活力就不好了,所以要冻存并尽快用于实验