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3.1实验材料
3.1.1菌株
酵母菌株AH109，带有四个报告基因，ADE2，HIS3，MELI和lacZ，在三个不同的GAL4上游激活序列和TATA box的控制下ADE2和HIS3提供了营养选择标记，可以减少假阳性克隆的机率：MELI编码α-半乳糖苷酶，当底物X-α-Gal存在时，阳性克隆就会变成蓝色；lacZ编码β-半乳糖苷酶，当底物为X- Gal存在时，阳性克隆就会变成蓝色。该菌株具体特点见图3-1，3-2。
图3-1酵母菌株AH109的报告基因
图3-2酵母菌株表现型
3.1.2质粒载体
阳性对照质粒pGBKT7-53；
阴性对照质粒pGBKT7-Lam；
对照的AD质粒载体pGADT7-RecT均为clontech公司提供。
Herring testes carrier DNA（10mg/ml）购自invitrogen公司。
载体信息见表3-1。
表3-1本实验所用酵母双杂交载体信息
3.1.2培养基
⑴YPDA培养基
Tryptone20g/L
Yeast extract10g1L
Adenine hemisulfute30mg/L
Agar20g/L
定容至950ml，PH=5.8
116℃高压灭菌15min，冷却至55℃时加入50m1过滤灭菌的40%的葡萄糖。
⑵营养缺陷培养基（1L）
YNB（Yeast nitrogen base without amino acids）6.7g/L
Agar20g/L
根据不同的营养选择性培养基加入如下的dropout Solution粉剂：
SD/-Leu-Trp（二缺）：在不含任何氨基酸的SD培养基中加入二缺粉剂0.64g/L。
SD/-His-Leu-Trp (三缺)：在不含任何氨基酸的SD培养基中加入三缺粉剂0.62⑶⑵待三缺平板上生
