测定蛋白质分子量的常用方法?

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回答者:网友

如果你手上有比较大量的纯度比较高的蛋白质的话。可以尝试用以下比较直接的方法:

1. isothermal titration calorimetry (ITC),直接测定两个蛋白互相作用的Kd值。

2. AUC,也就是超速离心分析。可以直接测定两个蛋白相互作用与否。

3.SAXS, 也就是X-ray小角散乱。不过技术难度比较大一些。

4. 溶液NMR,这个应该可以但不太了解。

5. 结晶再解构,这个不用解释了。比较究极一点。

6.cryo-EM,同上。比较究级的方法。

7. 最简单常用的,gel-filtration,观察有没有oligomer的分子量峰出现。但是相互作用弱的话很难观测到。

8.更简单常用的nativePAGE,同上,相互作用弱则很难观测到。

9.用氨基架桥试剂共价连接,然后SDS-PAGE。看看有没有oligomer的带。暂时想到这些,跨度比较大。


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