早期对AMPK活性的研究是通过
使HMGR和AcC活性下降来反映(Carlingetal，1987)。由于A
MPK与HMGR和ACC反应的时间相对较长，而且HMGR和
继问度了件家另财ACC本身的酶活易受环境影响
，因此这种方法不仅费时，而且难于准确定量分析。Davies等(1989)根据ACC的Ser79片段的13个氨基酸残基序列合
成了一种短肽，命名为SAMS肽，可用来直
接测定AMPK活性。其氨基酸序列为:His
研呢思程干解思歌模兵连一Me七一Arg
一Ser一Ala一Met一Ser一Gly一Leu一His一Val一Lys
一Arg一Arg，在C端加入两个Arg残基，可增加
肤与磷酸纤维滤纸结合，而可以与未反应的ATP分离开;将一
个Ser残基用Ala残基取代，可消除cAMP
众径杨听娘呢协气南K依赖蛋白激酶结合位点，从而使SAMS肤成
青为AMPK专一性底物。测定的基本原理为:用SAMS肤和〔gama一32P」ATP作为反应底物，以转移到SAMS中的32P的量来反映AMPK的活性。SAMS的合成是研究AMPK
过程中重要的一步(Hardie，1997)，提供了一种比以前更简单的分析AMPK活性的方法。研究
表明，对于AMPK，SAMS肽是比ACC肤更专一的底物，其不能被蛋白激酶磷酸化，最大反应速度是AC
C的2.5倍，增加了粗提取物中检测AMPK的灵敏度(Hardieetal，1989)。Davies等提出的方法己广泛用于AM
PK研究。这篇文献看过了? <猪肝细胞的分离培养和AMPK活性
调控的研究>另外一篇里面有些新方法
用化学
件发光方法代替同位素标记,建立一种新的体外检测AM
PK活性的方法,并利用该方法比较小鼠不同组织中AMPK的活性
<AMP激活的蛋白激酶的体外测活> http://www.***.cn/Artic
六杨科热并蛋宪策说le/CJFDTOTAL-QHXW200809030.htm
