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实验室用磷酸纤维素色谱纯化微管蛋白时,缓冲剂用什么比较合适呢?
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回答者:网友
可以用PIPES 缓冲剂。
PIPES的pH缓冲范围是6.1-7.5,不溶于水,溶于NaOH水溶液。根据已有的研究结果,PIPES可被应用于使用磷酸纤维素色谱纯化微管蛋白,用于凝胶过滤法纯化重组GTP结合蛋白ARF1和ARF2,作为缓冲液从大肠杆菌中结晶转酮酶。另外,由于PIPES能形成自由基,因此不适合应用于氧化还原体系。在阳离子交换色谱法,应当使用低浓度的PIPES缓冲液,这是因为PIPES具有相对较大的离子强度,而且其pKa值具有浓度依赖性。
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