His标签是目前原核表达最常用的标签,也是蛋白纯化的首选标签,主要原因如下:
1. His标签与细菌的转录翻译机制兼容,有利于蛋白表达;
2. His标签分子量非常小,只有0.84KD,一般不会影导感批衡计镇类大响目标蛋白的功能;
3. His标签非常小,不会改变目的蛋白自身的可溶性,相反一些大的标签如MBP,可大大犯制显提高融合蛋白的可溶性,尽管目的蛋白本身是不可溶或者折叠不正确;
4. His标签对目的蛋白本身特性几乎没有影响,而不像GST标签那样容易形成二聚体,从而影响蛋白的特性;
5. His标签免疫原性相对较低,可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫并制备概没块搞如投检联审抗体;
6. 可应用于多种蛋白表达系统,可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签表达;
7. 采用固定化金属离子亲和层析纯化His-Tag融合蛋白操作简便,纯化的条件温和,对蛋白的影响较小;
8. 蛋白纯化完之后可以不需切除此标签,也不会对蛋白产生功能影响。