B
解析 过程①为逆转罗石革绍但示会守育周录过程获得目的基因，缺少相应内含子，所以用这种南术轴电威赵事什跟方法获得的基因不能用于比目鱼基因组测序，A错误；将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因济急省，不再是抗冻基因，所以不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白，B正确；重组质粒上讨能统级做语有标记基因，并不是转入农杆菌才能筛选，而济送弦住部是用农杆菌转化法，有利于重组质粒导入受体细胞，C错误；应用DNA分子杂交更基太冷歌注技术，可以检测目的基因是否在受体细胞中存在一加，并不能检测其是否完全表达，D错误。
