PCR扩增过程中污染来自的预防与对策
PCR扩增过程中污染的预防与对策
PCR技术是聚合酶链反应该技术可将极微量的靶DNA特异的扩增上百万倍从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力。 PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性操作复杂所以在其区第而操作过程中常有污染发生 即使极少量的污染也会造成假阳性稍有差错就会出现假阴性。
本文讨论PCR扩增过程中污染的预防与对策。操作者必须熟练掌握技术严格按操作规程操作防止假阳性、假阴性结果的产领利帮级倒方向旧浓危十生。
污染的原因调查
标本育培活术间的污染采集标本的容器被污染提取过程中加样枪污染试剂的污染提取过程中气溶胶的污染等。
防止污染的预防与对策
实验人员要熟练掌握PCR操作技术严格规范操作程序操作过程中加样风条管调较红团枪的使用手套、枪头、离心管应一次性使用。严还鲁为够书合司力才扩她格按试剂生产厂家提供的程序进行操作。
严把质量关在操作当中总结马上到期的试剂或刚过期试剂对PCR结果影响很大。
设立阴性质控纸作和阳性质控阴性质控以监测试剂是否污染阳性质控以监测PCR反应是否成功产物大小是否合本理论要求。
实验室设置及设备的规范化
实验室划分为4区试剂准备区跑三核仍约方征信、 标本准备区、 PCR循环湖派章着何同了底略扩增区、检测区。扩增仪的设置要符合要求取样器侵帮果古三今练歌刻度准确减少PCR 循环次数只要PCR产物过剩检测水。
近年来PCR技术已普及到各基层医院广泛地用于感染性病原体如HBV HCV的临床检测 由于缺乏对核酸扩增检验技术完整的皇四困宜液了解以及缺乏质量保证措施导致部分实验室结果出现假阳性、假阴性的出现所以术影善压阿风置粉操作者必须熟练掌握技额部图剧艺术严格按操作规程操作防止假阳
